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移液器
用于定量转移液体的器具
移液器又称移液枪，是一种用于定量转移液体的器具。在进行分析测试方面的研究时，一般采用移液器（pipette）移取少量或微量的液体。移液器根据原理可分为气体活塞式移液器（Air-displacement pipette）和外置活塞式移液器（Positive-displacement pipette）。移液器也叫移液枪，是在一定量程范围内，将液体从原容器内移取到另一容器内的一种计量工具。被广泛用于生物、化学等领域。
基本信息
| 中文名 | 移液器 |
| 外文名 | locomotive pipette |
| 用于 | 定量转移液体 |
| 移液的方法 | 前进移液法 反向移液法 |
结构
移液器
工作原理
微量移液器加样的物理学原理有两种：使用空气垫加样和使用无空气垫的活塞正移动(positivedisplacement)加样。这两种不同原理的微量移液器有其不同的特定应用范围。
常见分类
- 根据工作原理可分为空气置换移液器与正向置换移液器；
- 根据能够同时安装吸头的数量可将其分为单通道移液器和多通道移液器；
- 根据刻度是否可调节可将其分为固定移液器和可调节式移液器；
- 根据调节刻度方式可将其分为手动式移液器和电动式移液器；
- 根据特殊用途可将其分为全消毒移液器、大容量移液器、瓶口移液器、连续注射移液器等。
临床应用
临床诊断实验室，生物技术实验室，药学和化学实验室，环境实验室，食品实验室
注意事项
- 在调节移液器的过程中，转动旋钮不可太快，也不能超出其最大或最小量程，否则易导致量不准确，并且易卡住内部机械装置而损坏移液器。
- 在装配吸头的过程中，用移液器反复强烈撞击吸头反而会拧不紧，长期如此操作，会导致移液器中零件松散，严重时会导致调节刻度的旋钮卡住。
- 当移液器吸头里有液体时，切勿将移液器水平放置或倒置，以免液体倒流而腐蚀活塞弹簧。
- 对移液器进行高温消毒时，应首先查阅所使用的移液器是否适合高温消毒后在进行处理。
选择标准
- 性能：准确性和重复性
- 耐用性/维护：移液器使用寿命长，仅需要很少的维护或维护成本低
- 符合人体工程学原理： 手感舒适，吸排液操作力轻，避免重复性肌劳损，退吸头力小
- 选择具有厂商资质售后服务的品牌。
选购
1．产品性能，即移液器的准确性和重复性。对于绝大多数用户而言，购买之前检测产品性能既有难度又无必要。因此，主要还是依据制造厂商提供的技术数据。但还是不要轻易相信卖家的口头承诺，一定要查阅制造商提供的书面材料。
2．产品的可靠耐用这一方面，主要取决于移液器所用的材料。对于外壳，应当有较高的耐冲击性、耐腐蚀性和较低的导热性（如PVDF材质）；对于活塞，目前市场上主要有不锈钢、陶瓷和塑料三种材质。不锈钢机械性能好、寿命长，只是不太适合用于强酸强碱的移液；陶瓷则有很高的耐腐蚀性，但机械性能较差。当然，优质的材料往往意味着更高的价格，所以需要综合考虑购买价格和寿命的因素。
3．产品的人体工程学设计主要可以考虑以下几点：
第一，完成一个移液循环拇指的移动距离短，意味着舒适度更高；
第二，比较相同量程的移液器完成一次排液（一定要按到底）所需的拇指用力，这是影响舒适性的关键，用力越少意味着长期使用造成手指损伤的风险越小；
第三，装卸吸头，同样是越省力越好；
第四，移液器的重量适中，过重会增加手的负担，但过轻也往往意味着材质可能稍差；
第五，其它的辅助设计，如壳体的磨砂设计以及指钩设计，有助于进一步提高舒适性。
使用
量程的调节
在调节量程时，如果要从大体积调为小体积，则按照正常的调节方法，逆时针旋转旋钮即可；但如果要从小体积调为大体积时，则可先顺时针旋转刻度旋钮至超过量程的刻度，再回调至设定体积，这样可以保证量取得最高精确度。
在该过程中，千万不要将按钮旋出量程，否则会卡住内部机械装置而损坏了移液枪。
枪头（吸液嘴）的装配
在将枪头（pipette tips）套上移液枪时，很多人会使劲地在枪头盒子上敲几下，这时错误的做法，因为这样会导致移液枪的内部配件（如弹簧）因敲击产生的瞬时撞击力而变得松散，甚至会导致刻度调节旋钮卡住。正确的方法是将移液枪（器）垂直插入枪头中，稍微用力左右微微转动即可使其紧密结合。如果是多道（如8道或12道）移液枪，则可以将移液枪的第一道对准第一个枪头，然后倾斜地插入，往前后方向摇动即可卡紧。枪头卡紧的标志是略为超过O型环，并可以看到连接部分形成清晰的密封圈。
移液的方法
移液之前，要保证移液器、枪头和液体处于相同温度。吸取液体时，移液器保持竖直状态，将枪头插入液面下2－3毫米。在吸液之前，可以先吸放几次液体以润湿吸液嘴（尤其是要吸取粘稠或密度与水不同的液体时）。这时可以采取两种移液方法。
一是前进移液法。用大拇指将按钮按下至第一停点，然后慢慢松开按钮回原点。接着将按钮按至第一停点排出液体，稍停片刻继续按按钮至第二停点吹出残余的液体。最后松开按钮。
二是反向移液法。此法一般用于转移高粘液体、生物活性液体、易起泡液体或极微量的液体，其原理就是先吸入多于设置量程的液体，转移液体的时候不用吹出残余的液体。先按下按钮至第二停点，慢慢松开按钮至原点。接着将按钮按至第一停点排出设置好量程的液体，继续保持按住按钮位于第一停点（千万别再往下按），取下有残留液体的枪头，弃之。
移液器的正确放置
使用完毕，可以将其竖直挂在移液枪架上，但要小心别掉下来。当移液器枪头里有液体时，切勿将移液器水平放置或倒置，以免液体倒流腐蚀活塞弹簧。
维护保养
移液器应根据使用频率进行定期维护，但至少每隔3个月维护一次，检查移液器是否有灰尘和污物，尤其注意其嘴锥部位。长期维护时需要清洁移液器内部，必须由经培训合格的人员拆卸。
1.移液器的清洁
2.移液器的消毒
可采用常规高温高压灭菌处理或紫外线照射灭菌进行消毒。
常见移液器
微量移液器
微量移液器是生物\化学实验室常用的小容量移取液体的单道微量移液器。
由于蒸汽压,密度,黏度不同,在吸取一些高黏度的物质时,如油脂,蛋白等,无法吸取。外置活塞移液器却能胜任。
具有与单道空气活塞式移液器一样准确的精度和误差系数。外置活塞移液器
可以适用于高黏度液体，如蛋白，树脂，最高黏度可达50,000mm2/s，最高密度可达13.6g/cm,如汞等；高蒸汽压的液体，最高蒸汽压可达500mbar，无论酒精还是一些碳氢化合物，都能轻松移取。发泡性液体的移取也毫无问题。
瓶口移液器
根据型号不同,通常用于中等流量(0.5ml-100ml)的液体的运输,如酸,碱等,根据吸取的液体的性质不同分为Dispensette III, Dispensette Organic 和Dispensette HF 。可以整体于121℃中消毒。
手动连续移液器
可以迅速而方便地完成连续移液工作,可以轻松完成2ul-5000ul的试剂。一次吸液完成49次之多。对于粘稠，高密度液体和高蒸汽压液体同样可以准确移取。适用 于Plastibrand PD吸头，Combitips吸头以及其他活塞式吸头。
电子连续移液器
利用微处理器控制操作可达到自动识别特定的PD-吸头
移液体积控制范围从1ul-50ml，移动7.01ul，70.1ul等将毫无问题。
自动分配，电子连续移液器可根据连续三次移液的平均间隔时间，然后进行分液。(所需时间可自动计算，不需人工计算和输入)。
电子滴定器
常用于食品，制药，石油化工等行业。
体积小，电池寿命长，适合于狭小空间和远离电源的地方使用。操作简便，吸入试剂时，按“Fill”键，手轮向上旋动，如开始滴定，按“Titr”键开始，手轮向下旋动，即开始显示滴定体积。数字显示，减少了人为读数和计算体积时所带来的误差。无需工具，用户可自行校准。
移液器校准
清洁后的移液器需要校准。移液器校准时必须在室温条件(25+/-2℃)下进行。参照移液器的使用说明，不同刻度10000@0@0ul必须分别进行校准。
- 将移液头里的气泡排除，选择好需要校准的刻度。
- 按加液键，将水加入空容器中称重，记录读数。
- 按照国标，移液器的校准采用“三点测试（最大量程的100%，50%和10%），每点六次”的规则，而供应商通常会选择两种规则：一是简易校准，也就是两点测试（最大量程的100%和10%），每点四次；二是严格校准，也就是三点测试（最大量程的100%，50%和10%），每点十次。使用者根据自己的实际需求选择一种规则完成测试后即进入计算环节。（根据平均值与实际值间的绝对差值进行调节，用工具来拧弹簧卡扣的松紧）
检修常识
常见问题 | 原因 | 解决方法 |
移液器渗漏 | ●使用了不合适的吸头 | ●用原厂的吸头 |
●吸头安装不正确 | ●稳妥安装吸头 | |
●吸头圆锥磨损货污染 | ●清洗安全圆锥 ●更换安全圆锥 | |
●活塞密封磨损或润滑剂不足 | ●清洗并给垫圈重上润滑剂 ●更换垫圈 | |
●仪器损坏 | ●送去维修 |
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使用方法
1.选择合适的移液器
移取标准溶液(如水、缓冲液、稀释的盐溶液和酸碱溶液)时多使用空气置换移液器，移取具有高挥发性、高黏稠度以及密度大于2.0g/cm的液体或者在临床聚合酶链反应(PCR)测定中的加样时使用正向置换移液器。如移取15ul的液体，最好选择最大量程为20ul的移液器，选择50ul及其以上量程的移液器都不够准确。
2.设定移液体积
调节移液器的移液体积控制旋钮进行移液量的设定。调节移液量时，应视体积大小而旋转刻度至超过设定体积的刻度，再回调至设定体积，以保证移取的最佳精确度。
3.装配吸头
4.移液
保证移液器、吸头和待移取液体处于同一温度；然后用待移取吸液体润洗吸头1-2次，尤其是黏稠的液体或密度与水不同的液体。移取液体时，将吸头尖端垂直浸入液面以下2-3mm深度(严禁将吸头全部插入溶液中),缓慢均匀地松开操作杆，待吸头吸入溶液后静置2-3秒，并斜贴在容器壁上淌走吸头外壁多余的液体。
5. 移液器的放置
使用移液器完毕后，用大拇指按住吸头推杆向下压，安全退出吸头后将其容量调到标识的最大值，然后将移液器悬挂在专用的移液器架上；长期不用时应置于专用盒内 。
移取方法
- 反向移液法先按下按钮至第二停点位置，慢慢松开移液操作杆回原点，排出液体时将移液操作杆按至第一停点位置排出设置好体积的液体，继续保持按住移液操作杆位于第一停点位置取下有残留液体的吸头而弃之。
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