SARS-CoV-2(新型冠状病毒)
病原学检测
1.实时荧光RT-PCR检测新型冠状病毒核酸阳性;
2.病毒基因测序,与已知的新型冠状病毒高度同源;
血清学检测
1.新型冠状病毒特异性IgM抗体和IgG抗体阳性;
2.新型冠状病毒特异性IgG抗体由阴性转为阳性或恢复期IgG抗体滴度较急性期呈4倍及以上升高。 (由于疫情随时可能变化,具体请参考国家卫健委,中国国家疾控中心相关诊治方案)
MERS-CoV
中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)
病原学检查主要包括病毒分离、病毒核酸检测。病毒分离为实验室检测的“金标准”。病毒核酸检测可以用于早期诊断。检测时应及时留取多种标本(咽拭子、鼻拭子、鼻咽或气管抽取物、痰或肺组织,以及血液和粪便)进行检测,其中以下呼吸道标本阳性检出率更高。 1.病毒核酸检测(PCR)。以RT-PCR(最好采用real-time RT-PCR)法检测呼吸道标本中的MERS-CoV核酸。
2.病毒分离培养。可从呼吸道标本中分离出MERS-CoV,但一般在细胞中分离培养较为困难。
SARS-CoV
严重急性呼吸综合征冠状病毒(SARS-CoV)
1.SARS-CoV RNA检测:SARS-CoV RNA阳性判断标准为PCR检测结果符合下列三项之一者可判断为阳性。 (1)至少需要两个不同部位的临床标本检测阳性(例如鼻咽分泌物和粪便)。
(2)收集至少间隔2天的同一种临床标本送检检测阳性(例如2份或多份鼻咽分泌物)。
(3)在每一个特定检测中对原临床标本使用两种不同的方法,或从原标本新提取RNA开始重复PCR检测阳性。
PCR检测结果的确认:①使用原始标本重复PCR试验;②在第二个实验室检测同一份标本。
2.SARS-CoV特异性抗原N蛋白检测:定性检测血清或血浆标本中SARS-CoV核衣壳(N)抗原,用于SARS-CoV感染的早期辅助诊断。
3.SARS-CoV特异性抗体检测:特异性抗体检测诊断SARS标准为符合以下两者之一即可诊断为SARS。
(1)平行检测急性期血清抗体和恢复期血清抗体发现抗体阳转。 (2)平行检测急性期血清抗体和恢复期血清抗体发现抗体滴度升高≥4倍。 FeCV
猫冠状病毒FeCV
猫传染性腹膜炎(FIP)是目前导致猫死亡的重要原因之一。猫冠状病毒FeCV(Feline enteric Coronavirus)是高度传染性病毒而且偏好发生在数量及种类繁多而且养在一起的家养猫。FeCV是广泛的猫冠状病毒Feline Coronavirus(FCoV)中的一种。
样品
需1ul血清或血浆,只能检测猫的样品。样品可在2~8℃保存7天,如果需要更长的保存,样品可保存在-20℃。严重红细胞溶解或脂溶血会产生干扰的颜色,所以尽可能去得到更好质量的样品。 准备洗涤液
让洗涤浓缩液达到室温,轻轻地倒置混匀。用蒸馏水或去离子水稀释洗涤浓缩液(1份洗涤浓缩液加至9份水中),稀释后的洗涤液可保存于2~7℃。 结果
a.检测的有效性必须是:阳性质控孔里的液体呈清晰的蓝色,而阴性质控孔里的液体保持清澈。
c.如果样品孔里无颜色变化表明没有感染FIP疾病。
以下内容物包含在试剂盒里:
包被好的酶标板8×12孔
阳性质控血清1.5ml
阴性质控血清7.0ml
蛋白A HRP标记物5.0ml
浓缩洗涤液100.0ml
注意事项
*试剂盒使用前恢复至室温(21~25℃)
*不同样品使用不同的加样器头
*不要把试剂盒直接暴露在阳光下
*不要使用过期的试剂或不同试剂盒里试剂一齐混杂使用
*严格按照步骤操作,不适当的洗涤或试剂污染将产生非专一性的颜色
*仅限兽医使用
保存和稳定性
将试剂盒和稀释的洗涤液保存于2~7℃,不要冷冻。只要在适当保存条件下,试剂在有效期内是稳定的。